期刊简介
《公共卫生与预防医学》杂志于1990年创刊，面对国内外公开发行。2009年经过多项学术指标综合评定及同行专家评议推荐，被收录为“中国科技论文统计源期刊”（中国科技核心期刊）。预防医学研究的主要内容涉及流行病学、卫生统计学、卫生经济学、健康教育学、卫生管理学、社会医学、传染病学、寄生虫学、媒介生物学、营养学、毒理学、消毒学、环境医学、职业病学、地方病学、卫生检验、食品卫生学、环境卫生学、劳动卫生学、放射卫生学、卫生工程学、少儿卫生学、妇幼卫生学、优生学等20多个学科。
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- 杂志名称：公共卫生与预防医学杂志
- 主管单位：湖北省卫生计划生育委员会
- 主办单位：湖北省预防医学会;中华预防医学会;湖北省疾病预防控制中心
- 国际刊号：1006-2483
- 国内刊号：42-1734/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：期刊收录：维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中)
利用流感病毒反向遗传学操作系统表达绿色荧光蛋白(EGFP)
徐柯；邢学森；吴杨；喻明霞；龚晓艳；徐军强
关键词：反向遗传学, 荧光蛋白基因, 克隆, 转染, 293T细胞
摘要：目的 构建基于RNP复合体的流感病毒反向遗传学操作系统,并利用该系统表达绿色荧光蛋白.方法 将人源pol Ⅰ启动子分别插入真核表达载体pcDNA3和原核质粒pUC18,获得pol Ⅰ/pol Ⅱ双启动子表达载体pCHBW和pol Ⅰ单启动子表达载体pPol IR;来源于禽流感病毒H5N1湖北分离株A/Chicken/Hubei/489/2004的基因被克隆到pCHBW上,获得pCHBW-PB2、pCHBW-PB1、pCHBW-PA、pCHBW-NP;将荧光蛋白基因置换NA基因的编码区进而克隆到pPol IR上获得pPol IR-NA (EGFP)；这些质粒共转染293T细胞并观察荧光.结果 所构建的载体均经酶切和测序验证正确.pCHBW-PB2、pCHBW-PB1、pCHBW-PA、pCHBW-NP和pPol IR-NA (EGFP)共转染293T细胞后能观察到绿色荧光,Western-blot实验证实被转染的293T细胞表达绿色荧光蛋白(EGFP).结论 基于RNP复合体的反向遗传操作系统构建成功,并表达绿色荧光蛋白.
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